EFICACIA DE UNA
PRUEBA ELISA EN MUESTRAS DE LECHE PARA LA
VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA DE LA BRUCELOSIS BOVINA
Meds.Vets. Víctor Vanzini y Susana Torioni de Echaide
En un programa de control y erradicación de la brucelosis bovina se deben considerar: 1) las estrategias para la eliminación de la enfermedad en los rodeos, y 2) la implementación de un sistema de vigilancia que permita analizar la evolución del programa y a la vez detectar en forma precoz el ingreso de la enfermedad a los rodeos libres de ella. El primero de los aspectos ha sido abordado en repetidas oportunidades y no existen demasiadas dudas respecto de las estrategias a utilizar para lograr el control y saneamiento de un establecimiento; pero el segundo, todavía es una asignatura pendiente y si bien se genera mucha información desde las empresas lácteas no existe un mecanismo de acción para actuar inmediatamente en un establecimiento cuando se sospecha el ingreso o reingreso de la enfermedad.
En los cuatro departamentos centrales de la provincia de Santa Fe (Las Colonias, Castellanos, San Martín y La Capital) se han logrado sustanciales progresos en la campaña de erradicación de la brucelosis. Desafortunadamente, todavía no se le ha prestado la atención suficiente a la vigilancia y ésta es una tarea que necesariamente deberá iniciarse rápidamente, de lo contrario se corre el riesgo de sufrir retrocesos con un importante impacto económico negativo.
En el ganado lechero, la única herramienta disponible para controlar periódicamente si los rodeos o áreas libres de brucelosis mantienen esa condición es la prueba del anillo en leche (PAL), la cual se realiza en muestras del total de un ordeño (MTO). Un resultado positivo constituye un diagnóstico presuntivo de la presencia de la enfermedad, lo cual debe ser confirmado por medio del análisis de muestras individuales.
Referente a la eficacia de la PAL, los datos más alentadores indican que con tres pruebas consecutivas fue posible detectar como presuntamente infectados alrededor del 87% de tambos confirmados posteriormente por análisis individuales. Por otra parte, en el 97% de los tambos con tres análisis consecutivos negativos no se encontraron animales con brucelosis.
En la EEA Rafaela del INTA, se realizaron estudios comparativos para evaluar la eficacia de la prueba oficial PAL comparándola con otra inmunoenzimática (ELISA) que posee una elevada sensibilidad, condición deseable para su utilización en la vigilancia de la brucelosis en tambos.
De 50 establecimientos que resultaron positivos o negativos a las pruebas PAL y ELISA en MTO (tabla 1), se extrajeron muestras individuales de leche que fueron analizadas con un ELISA indirecto. De cada vaca positiva a ELISA en leche se extrajo una muestra de suero sanguíneo que fue analizada por las pruebas BPA (Buffered Plate Antigen) y FC (Fijación del Complemento), prueba de referencia internacional. En nueve tambos PAL/ELISA negativos, se extrajeron muestras de suero y leche a todas las vacas en ordeño y se procesaron por las pruebas de ELISA en leche y ELISA, BPA y FC en suero sanguíneo.
Tabla 1. Tambos evaluados en relación con las distintas combinaciones de resultados de PAL y ELISA en muestras del total de un ordeño.
Nº tambos |
Nº vacas (rango) |
PAL |
ELISA |
16 |
11 - 278 |
+ |
+ |
4 |
28 - 70 |
+ |
- |
11 |
41 - 125 |
- |
+ |
19 |
56 - 263 |
- |
- |
Se consideró establecimiento infectado, a los tambos que poseían al menos una vaca positivo a la prueba de FC. Se analizó la eficacia de cada prueba para detectar establecimientos infectados y libres de brucelosis.
De los 50 tambos analizados, se detectaron 23 infectados y 27 no infectados. ELISA resultó positivo en 22 de los 23 (95,6%) establecimientos infectados, mientras que PAL identificó sólo 16 (69,6%). En el grupo de tambos no infectados las pruebas tuvieron un comportamiento similar, ELISA clasificó como negativo a 22 de los 27 (81,5%) analizados y PAL a 23 (85,2%). En los 9/19 negativos a PAL y ELISA (150-203 vacas) no se observaron vacas positivas a FC.
Si bien el número de establecimientos analizados es reducido, surge que el ELISA fue más sensible que la PAL en la detección de tambos con brucelosis. Para la vigilancia epidemiológica, es necesario contar con pruebas de elevada eficacia que permitan la detección precoz del ingreso de la enfermedad a un establecimiento. La incorporación del ELISA aplicado a MTO, reduciría la posibilidad de clasificar como negativo un establecimiento que posee animales con brucelosis.
Con respecto a los resultados obtenidos de muestras de tambos no infectados el comportamiento fue similar y las dos pruebas dieron resultados falsos positivos. La doble prueba brindó la mayor garantía de clasificar como negativos a establecimientos con sus vacas libres de brucelosis.
De acuerdo con los resultados de este ensayo se infiere que la eficacia de la PAL para detectar tambos infectados es inferior al ELISA, por lo tanto la incorporación de esta prueba al sistema de vigilancia epidemiológica de la brucelosis sería beneficioso, porque permitiría la detección precoz del ingreso de la brucelosis a un rodeo libre y accionar inmediatamente para evitar la dispersión de la enfermedad dentro del establecimiento con la consecuente implicancia económica.